簡(jiǎn)要描述:人結腸癌細胞,HCT-15DNA fingerprinting證據表明,這株細胞和DLD-1(ATCC CCL-221,人結直腸腺癌)來(lái)源于同一個(gè)人;但同工酶及細胞染色體組型分析仍存疑問(wèn);細胞呈CSAp陰性(CSAp-);角蛋白陽(yáng)性。
詳細介紹
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人結腸癌細胞,HCT-15
細胞名稱(chēng):人結腸癌細胞;HCT-15
組織來(lái)源:結腸癌細胞
培養條件:RPMI-1640+10%FBS
形態(tài):貼壁;上皮細胞樣
背景:細胞呈CSAp陰性(CSAp-);角蛋白陽(yáng)性。
Cells-0098 HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 500000cells/瓶
細胞名稱(chēng):人盲腸腺癌細胞;HCT-8
組織來(lái)源:盲腸腺癌細胞
培養條件:RPMI-1640+10%FBS
形態(tài):貼壁;上皮細胞樣
背景:HCT-8與HRT-18是一樣的。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
Cells-0099 HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞) 500000cells/瓶
細胞名稱(chēng):人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-A
組織來(lái)源:子宮內膜腺癌細胞
培養條件:McCoy’s+10%FBS
形態(tài):貼壁;上皮細胞樣
動(dòng)物細胞培養,大致的步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細胞,配制成細胞懸浮液.把細胞液放到培養瓶中,在培養箱里培養--------原代培養.
但是,不要以為這樣就能一直無(wú)限培養下去.
因為人結腸癌細胞,HCT-15在那個(gè)瓶壁上生長(cháng)的時(shí)候,如果大量增殖,細胞之間會(huì )彼此相碰,細胞細胞就會(huì )停止分裂增殖,出現一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開(kāi),然后再配制成細胞懸浮液,分開(kāi)裝到好幾個(gè)瓶子里繼續培養--------傳代培養.
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。貼壁細胞凍存時(shí),棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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