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關(guān)于如何鑒定收到的新細胞是否有污染

更新時(shí)間:2019-12-05      點(diǎn)擊次數:4662

一、肉眼觀(guān)察以下幾項:
1. 細胞瓶身:
如果瓶身上沒(méi)有裂縫,正常;如果瓶身上有裂縫,則污染幾率非常大。
2. 培養基顏色:
如果培養基顏色是紅色或者粉色,正常;如果是橙色,則可能是污染或者細胞過(guò)密;如果是黃色,則污染幾率非常大。
3. 培養基澄清度:
如果培養基澄清,正常;如果有少許漂浮物,則可能是污染或者有細胞凋亡;如果培養基很渾濁,甚至出現絮狀物,則污染幾率非常大。


 

二、進(jìn)行顯微鏡下觀(guān)察(通常觀(guān)察前需先靜置細胞1-2h)
顯微鏡下可以清晰觀(guān)察到細胞是否有菌類(lèi)污染,菌類(lèi)污染通常分為桿菌、球菌和霉菌,為了方便大家分辨,我特地找了之前收到有典型污染的細胞照片,希望能幫助大家判斷。
1. 桿菌

 

 

 

 

常見(jiàn)的有大腸桿菌,長(cháng)度通常在2-5um左右。

2. 球菌

 

 

 

 

常見(jiàn)的有葡萄球菌,直徑通常在1-2um左右。

3. 霉菌

 

 

 

 

常見(jiàn)的有毛霉,菌絲寬2-10um左右,長(cháng)度短則幾十um,長(cháng)則可達幾mm。

       需要提醒的是,因為運輸過(guò)程中細胞離開(kāi)了其正常生長(cháng)所需要的環(huán)境,部分細胞會(huì )出現凋亡或產(chǎn)生細胞碎片,容易誤認為是細菌污染;另外培養基中的雜質(zhì)纖維也容易誤認為是霉菌污染,具體區分方法如下:

1.細胞碎片和桿菌
細胞碎片只會(huì )隨著(zhù)細胞狀態(tài)的變差而變多,通常增長(cháng)不快;桿菌則增殖非常快,以常見(jiàn)的大腸桿菌為例,常溫25℃增殖1倍需要40min左右(此數據可查閱相關(guān)文獻驗證),培養基很快變黃且渾濁。

2.凋亡細胞和球菌
凋亡細胞通常只比正常細胞小一點(diǎn),只會(huì )隨著(zhù)細胞狀態(tài)的變差而變多,通常增長(cháng)不快;球菌則要小很多,且成串或成團,培養基很快變黃且渾濁。
3.雜質(zhì)纖維和霉菌
雜質(zhì)纖維通常是過(guò)濾時(shí)殘留的濾紙纖維,或者是酒精棉球上的棉纖維,在不開(kāi)瓶處理的情況下其數量不會(huì )增長(cháng);霉菌的話(huà)雖然增殖速度沒(méi)有桿菌和球菌快,但還是會(huì )有明顯增殖。

 

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